Re: [難過] 實驗又失敗了已回收

看板WomenTalk (女人話題)作者 (蚊子)時間9年前 (2016/12/28 19:04), 9年前編輯推噓5(505)
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妹仔~ 讓曾經度過漫漫"西方人生"的姐姐來回你一下 從你的狀況我看到幾個關鍵字 1. 電泳跑不動 =>running buffer pH和濃度對不對 電壓設定夠不夠強 2. 只要一小時你跑了12小時=> 電壓到底對不對啊?? 先假設你的stacking gel有跑過去, 在separating gel卡關 =>separating gel濃度過高 如果是連stacking gel都跑很慢=>膠體濃度肯定有錯 3. 染完的膠全部碎掉=>妳配的膠肯定有問題 濃度太高太硬 才會碰撞就碎光光 (如果是濃度太低 那會變成鼻涕糊) 4. 膠台會漏=> 置膠器用久了會這樣是正常的 先檢查玻璃有沒有破掉或缺角 底下海綿有沒有放平整 最重要的絕招 上面夾子夾好後再插一根blue tip (讓他用力夾~~~~) 然後 用tip加入1mL 酒精 看他會不會漏 如果漏了就重夾 不會漏就把酒精倒掉 再接著繼續做膠 5. 如果妳的漏是指跑膠的時候 兩片膠中間的buffer會跑到外面 =>請浪費buffer 把內外都加到一樣高的水平面 就不會漏了 或是在外層那裡放一塊冰保/50mL離心管加水製的冰 讓外層跟內層的水平面等高 實驗就是這樣 越急越容易出錯...... 所以姐建議你先去吃晚餐 洗個澡 看一下結衣整理一下心情 明天拿出你的protocol 把所有buffer 親自重新配過 然後再做一次 這次先不要放樣品 只單跑marker 確定這次做的膠和buffer可以了 再開始跑你的樣品 姐曾經買的是整組配好的各種buffer 結果還是跑出富士山 就因為同事分裝時搞混+標錯.... 所以當然配出一坨沒辦法用的膠 做實驗最好從一開始的buffer就自己配一套 不要混用!! 最後 姐勸你好好誠實的告訴老師你失敗了 態度要低 實驗失敗絕對有原因 而且在你 不要急著澄清說你都有照做 (就算是buffer前人配錯 但你沒事前check 所以還是算你的) 有時候逃避很可恥但有用 但在實驗室不但沒用還會被黑 (茶) 加油啦~ ps. 我還以為我來到生科版.......囧 ※ 引述《chith (74)》之銘言: : 明明只是個簡單的SDS : 為什麼可以出那麼多狀況 : 為什麼電泳跑不動 : 為什麼無論我怎麼裝它都會漏水 : 明明只要一小時的東西我用起來跑了快要12小時 : 為什麼染完的膠全部碎掉變成一坨 : 有好多人在等我的實驗結果 : 大家都要做報告 : 大家都準備了樣品給我跑膠 : 我居然跑到膠碎掉了 : 也已經沒有多餘的樣品重做了 : 到現在還不敢跟老師說我又搞砸了 : 不知道該怎麼跟同學交代話花三個星期做的實驗居然在最後ㄧ步驟失敗了 : 好害怕...... : 好想哭...... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 36.237.92.231 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/WomenTalk/M.1482923044.A.4F9.html ※ 編輯: lydiayeh (36.237.92.231), 12/28/2016 19:10:21

12/28 19:10, , 1F
後來我跑第二片膠就成功了
12/28 19:10, 1F

12/28 19:10, , 2F
現在留下來重做第一片,大概明天才會跑完......
12/28 19:10, 2F

12/28 20:43, , 3F
推,然後給原po拍拍,恭喜你做出來了
12/28 20:43, 3F

12/28 20:43, , 4F
但是之後還是要找出來是哪裡出了問題哦,不然下次還
12/28 20:43, 4F

12/28 20:43, , 5F
是有可能再發生的
12/28 20:43, 5F

12/29 11:10, , 6F
有認真有推欸
12/29 11:10, 6F

12/29 11:11, , 7F
不過明天要跑就明天做就好啦 ,不然pH會跑掉吧 ,做
12/29 11:11, 7F

12/29 11:11, , 8F
膠才一小時
12/29 11:11, 8F

12/29 11:39, , 9F
專業解說,你人真好~~~~
12/29 11:39, 9F

12/29 13:01, , 10F
生科版 好溫馨 實驗一直失敗 真的心情會很沮喪 QQ
12/29 13:01, 10F
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